科研服务

基因文库特指生物来源的、人工合成的或克隆技术等所得到的一个重组分子群。在体外使基因发生大量变异,并从中定向选择出所需的突变体的过程。基因突变文库是基因合成、基因突变和定向进化研究相结合的产物。

糖果派对6163银河可以根据您的需求,协助设计合成并构建各种基因文库。交付的文库可以质粒文库,也可以是线性双链DNA文库。

文库类型

  • 定点饱和突变文库
    • 使任何一个或者多个氨基酸位点都可以被其它19种常见的氨基酸所替代
    • NNK文库,简并文库中的一种
    • 可快速、高效地探究蛋白功能、活性中心及特殊活性构型等
  • 扫描文库
    • 点饱和扫描NNK
    • 特定氨基酸扫描 (丙氨酸、组氨酸等)
    • 通过用丙氨酸逐一取代每一个位置或关键位置的氨基酸,发现对蛋白功能、相互作用及形态具有重要功能的氨基酸残基
  • 随机突变文库
    • 利用可控的易错PCR技术
    • 可以在一个定义的小区域创建随机氨基酸替换
    • 突变频率可以设置为1~20个突变/kb的范围内的任意一个值
  • Trimer 文库
    • Trimer 引物合成
    • 相较于 NNK,只含有20种密码子
    • 更精准、针对复杂文库性价比更高
  • Trimer组合突变文库
    • 通过对目标蛋白的核酸编码序列进行设计,将目标区域的多个氨基酸位点同时突变成多种氨基酸,从而产生不同的突变组合,以此对应的不同突变类型的核酸序列形成的文库。目前,被广泛应用于蛋白质工程、抗体筛选、药物发现、酶工程等研究领域

服务优势

  • 超高的突变精确性、更丰富的文库多样性
  • 更大的文库容量、更高的筛选成功率

服务流程

意向确认

1

文库设计

2

订单确认

3

文库合成

4

质检

5

发货

6

交付标准

  • 线性DNA文库:1-2 μg冻干粉
  • 质粒DNA文库:5-10 μg冻干粉
  • 发货文件:测序结果比对图、文库电泳图、酶切图

文库的应用

  • 蛋白质工程:扫描、定点或随机突变库,可允许您测试一个蛋白质内数个特异位点上的有利替换,以增强蛋白质性能,例如:蛋白-蛋白互作、溶解度、稳定性、折叠及催化活性。
  • 抗体工程:定点饱和或氨基酸定制文库,可允许在抗体高变位置内跨一个区域或多个区域引入多样化位点,从而筛选有利的抗体特性。
  • 定向进化:随机库可允许通过筛选大型群体来测试预期形状,从而改良结构特性或功能特性。
  • 基因表达:组合库可允许通过改变载体中的调控元件组合,从而优化蛋白质的表达性能(如:表达量、可溶性、活性及稳定性等)。
  • 基因敲除:利用CRISPR/Cas9技术建立基因组突变文库或与某类功能相关的基因突变体库,sgRNA文库,通过功能性筛选及富集,及后续的PCR扩增及深度测序分析,发掘与筛选与表型相关的基因。
  • 合成和结构生物学:丙氨酸和截断库用于高通量蛋白质结构研究中,此类研究涉及:功能、稳定性、溶解度、催化活性、折叠和结构域-结构域相互作用。

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