科研服务

TA克隆技术（TA cloning）利用Taq聚合酶具有末端转移酶（TdT）活性，但却不具有3'-5'端外切酶校准活性的特点，可在PCR产物的3'端加上一个非模板依赖碱基“A”。pMD18-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体，它是由pUC18载体在Xba I和Sal I识别位点间插入一个EcoR V位点，然后用EcoR V进行酶切使质粒线性化，并在它的3'端添加“T”构建而成。因其3'端带有一个突出的“T”尾，能高效地与带“A”尾的PCR产物连接，极大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR产物最简便、快捷的方法。

产品内容

插入片段大小 交货周期 价格(元) 备注
< 800 bp 5个工作日 200元/个
800～2000 bp 7个工作日 请询价

服务说明

  • 请提供克隆片段的相关信息，包括名称，大小、样品是否带有”A”尾以及PCR产物是否已纯化。
  • 已纯化的PCR产物请确保使用的溶剂为灭菌的双蒸水。
  • 请提供浓度≥20ng/μl,总体积≥50μl的PCR产物，所需DNA的总量会随片段大小的不同而有所变化。
  • 请务必在订单上注明PCR所用引物序列，以便用于克隆结果的核对分析。
  • 当克隆结果中包含合作伙伴提供的单项部分引物序列，我们即视实验成功，将收取全额的实验费用。
  • 若序列中包含高GC、Poly等特殊或复杂结构导致测序和中断，我们即视实验成功，将收取全额的实验费用。
  • 项目完成一个月后，若合作伙伴无要求返还菌液或质粒等，则我们将代为销毁。

实验步骤

鉴定样品DNA片段长度和浓度

1

加“A”尾（若PCR产物已带“A”尾则跳过此步）

2

PCR产物和pMDI8-T载体连接

3

转化并筛选重组子

4

重组子测序

5

测序结果分析

6

订购信息

下载产品订购表或产品订购合同并按要求填写后发送至 tech@generalbiol.com ，公司收到订单或产品订购合同会及时与您回复及确认，并安排相关人员生产发货。

  • 订单或合同下载 为保证您的订单或订购合同顺利上传，请您下载最新订单或订购合同。
  • 邮箱： tech@generalbiol.com
  • 电话： 0550-3121666转8820